romance Coronavírus (NCoV 2019) Nucleic kit de detecção de ácido (Fluorescente RT-PCR)

【Pretendido Use】

O kit é um TaqMan sonda fluorescente em tempo real PCR detectar qualitativamente ORF1ab, n genes nucleic ácido de 2019-nCoV em esfregaço de garganta, escarro em pacientes com sintomas suspeitos de pneumonia e casos de agrupamento.

Os resultados do teste são apenas para referência clínica e não podem ser considerado apenas como referência para o diagnóstico clínico. recomendado fazer análise manifesta com relação aos sintomas clínicos e outros resultados laboratoriais.

operadores devem ter experiência de treinamento profissional em amplificação de genes ou teste de métodos de biologia molecular e ter qualificações relevantes para operações de laboratório. O laboratório deveria têm precauções de segurança biológica e procedimentos de proteção razoáveis.

【 princípio de teste 】

neste kit, primers e sondas são projetados para as regiões conservadas e específicas do ORF1ab, n de 2019-nCoV, respectivamente. fluorescente PCR é usado para detectar rna viral após nucleic purificação ácida da amostra RNA.

Este kit de teste usa fluorescente em tempo real PCR tecnologia.Durante PCR amplificação, a sonda se liga ao modelo e a extremidade 5 ' grupo repórter da sonda é clivado pelo Taq enzima (5 '→ 3' atividade de exonuclease), afastando-se assim de o grupo de extinção para gerar um sinal fluorescente. A curva de amplificação em tempo real é plotada automaticamente com base no sinal de fluorescência detectado e o valor ct da amostra é calculado (O número de ciclos experimentados quando o sinal de fluorescência em cada tubo de reação atinge o limite estabelecido). FAM , VIC e texas red fluoróforos são utalizados marcar ORF1ab gene, sondas de gene n em solução de reação. usando um teste, detecção qualitativa dos dois genes acima de 2019-nCoV pode ser executado simultaneamente.

Para evitar o resultado falso negativo, o kit é fornecido com um controle interno (IC), que é marcado com Cy5 grupo fluorescente que poderia ser usado para monitorar o procedimento de extração e a solução de reação.

【 componentes principais 】

Nota ¹ : Os diferentes lotes de componentes não podem ser trocado.

Nota ² : O kit de teste não contém nucleico reagente de extração de ácido, prepare o reagente antes de usar.

1. manipulação de amostra

adicionar 10μL de controle interno em 200μL de controle positivo e controle negativo, respectivamente na forma de realizar o nucléico extração ácida.

2. reagente preparação:

sistema preparação: take pré-instalado Nucleic liofilizador de amplificação de ácido, seguido pela abertura da bolsa de alumínio e centrifugação imediatamente. quantidade de amostra de cada teste deve ser os múltiplos de 8 contendo um controle positivo e um controle negativo.add 35μL sem nuclease água para cada reação tubo.

3.Amostra Carregando:

adicionar 5μL amostra nucleico ácido a ser testado, controle positivo, controle negativo que o volume total da reação é 40 μL na reação alocada solução. para isso não precisam de uma mistura fina e apenas feche a tampa do PCR tubo de reação, centrifugue o líquido na parede do tubo o fundo do tubo, processe assim o PCR amplificação.

após a verificação, estima-se que a adição de 5μL-10μL óleo de parafina no PCR sistema não afetará o PCR resultar, mas evitar a contaminação e a vaporização do líquido.